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造成ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因解析

點(diǎn)擊次數(shù):13185   發(fā)布時間:2016/9/27 9:33:53

         ELISA實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,操作者們所犯的問題也各有不同。日前下午,遼寧中醫(yī)藥大學(xué)趙老師聯(lián)系到我司何經(jīng)理咨詢問道:為什么ELISA標(biāo)準(zhǔn)品會出現(xiàn)“溢值”的現(xiàn)象呢?看到問題后,何經(jīng)理立即轉(zhuǎn)到技術(shù)部,5分鐘后,上海恒遠(yuǎn)公司技術(shù)部給趙老師去電話,解析造成elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因:
    ① 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。
    ② 孵育時間/溫度不正確。
    ③ 在孵育時為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物:在孵育時需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物,以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。
    ④ 檢測波長不正確:要保證分光光度劑的檢測波長是正確的。
    ⑤ TMB底物的顯色時間過長:請監(jiān)控顯色時間。說明書中所示的顯色時間可能因?yàn)闇囟群推渌鼨z測條件的不同而稍有變化。
    ⑥ 樣品不適合此檢測:在說明書中會列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍,超出范圍的標(biāo)本可能不適于此試劑盒或者檢測條件需要摸索。
    ⑦ 樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染:樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果“溢值”。
    ⑧ 偶合試劑不正確稀釋:要嚴(yán)格按照說明書來稀釋偶合試劑,濃度過高會造成OD的“溢值”HRP偶合試劑的不正確稀釋
    ⑨ 所用稀釋液不對:只能使用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
     找到問題原因后,解決問題就容易的多了。各位朋友們也是一樣,在檢測的時候一定要認(rèn)真仔細(xì),并嚴(yán)格按照要求來操作。實(shí)驗(yàn)前,對ELISA試劑盒說明書仔細(xì)的閱讀。上海恒遠(yuǎn)祝大家實(shí)驗(yàn)成功! 
                              
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原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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