我公司三月中旬上新了一批新的elisa試劑盒,“三八”促銷還沒結束呢,需要的快快來購買哦!我們從ELISA實驗的廣泛性來說,讓很多朋友們都對其有所了解,以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。上海恒遠告訴您小鼠ELISA試劑盒在實驗中需要具有的四個條件選擇。
1、固相載體的選擇
許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。ELIAS試劑盒目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,ELIAS試劑盒在使用前均可進行篩選,用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
2、酶標記抗體工作濃度的選擇
首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”,在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
3、酶的底物及供氫體的選擇
對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,ELIAS試劑盒應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
4、包被抗體或抗原的選擇
將抗體或抗原吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質包被的*適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
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