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CYFRA21-1,人細胞角蛋白21-1片段ELISA試劑盒原理

CYFRA21-1,人細胞角蛋白21-1片段ELISA試劑盒原理
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價格: 4900

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采購度:154    原產地:美洲

發布時間:2018/1/31 15:33:14

產品簡介:CYFRA21-1,人細胞角蛋白21-1片段ELISA試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)的含量。

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詳細信息
CYFRA21-1,人細胞角蛋白21-1片段elisa試劑盒原理

本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人細胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

CYFRA21-1,人細胞角蛋白21-1片段ELISA試劑盒原理主要優點
1.高效、靈敏、特異的抗體;
2. 穩定的重復性和可靠性;
3. 吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4. 適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
5. 限度的節省實驗經費。

ELISA試劑盒樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作流程
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

CYFRA21-1,人細胞角蛋白21-1片段ELISA試劑盒原理注意事項
1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全。

更新時間:2024/11/20 9:12:24

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